基因合成是用人工方法合成基因的技术，是基因获取的手段之一，相对于从已有生物中获取基因来说，基因合成无需模板，因而不受基因来源限制。基因合成有两种途径，一是向基因合成公司订制，二是作本地基因合成。由于基因合成技术还没有一个统一的方法，基因合成的技能和经验在合成过程中具有决定性的影响，所以大部分基因合成都是在专业人员手中完成的，这也决定了途径一是主要渠道。
DNA基因合成仪合成技术原理：
采用固相亚磷酰胺三酯法合成DNA的片段,它具有高效、快速的偶联以及起始反应物比较稳定的特点。亚磷酰胺三酯法是将DNA固定在固相载体.上完成DNA链的合成的，合成的方向是由待合成引物的3'端向5'端合成的,相邻的核苷酸通过3'→5'磷酸二酯键连接。
DNA基因合成仪反应步骤：
1.将预先连接在固相载体CPG上的活性基团被保护的核苷酸与三氯*酸反应,脱去其5'-羟基的保护基团DMT ,获得游离的5'-羟基。
2.亚磷酰胺保护的核苷酸单体, 与活化剂四氮唑混合.得到核苷亚磷酸活化中间体. 它的3'端被活化，与CPG载体上连接碱基的5'-羟基发生缩合反应。
3.带帽(capping)反应。缩合反应中会有少量5"-羟基没有参加反应.用乙酸酐和1-甲基咪唑封闭5"-羟基,使其不能再继续发生反应,这种短片段在纯化时可以分离去除。
4.在氧化剂碘的作用下,亚磷酰形式转变为更稳定的磷酸三酯。
更新时间：2021-12-18 
阅读：1898
关闭
电话
询价
